Hé! Mint beszállítóELISA kézi munkaállomás, Első kézből láttam, hogy mennyire frusztráló lehet a kézi munkaállomás ELISA -tesztjén belüli vizsgálati variabilitás kezelése. De ne aggódj, azért vagyok itt, hogy megosszam néhány tippet és trükköt, hogy segítsen csökkenteni ezt a variabilitást, és megbízhatóbb eredményeket érhet el.
Azon belüli megértés - vizsgálati variabilitás
Először beszéljünk arról, hogy mi a vizsgálati variabilitás. Alapvetően ez a különbség az eredmények között, amikor ugyanazt a mintát többször futtatja egyetlen vizsgálaton belül. Ez valódi fájdalom lehet a nyakban, mert megnehezíti az adatainak megbízását. Van egy csomó tényező, amely okozhatja ezt a variabilitást, például pipettázási hibákat, következetlen inkubációs időket és hőmérsékleti ingadozásokat.
Pipettázási hibák
A pipettázás az ELISA teszt egyik legkritikusabb lépése, és ez egyben az egyik legnagyobb variabilitás forrása. Még egy kis hibát is a minta vagy a pipetta mennyiségének térfogata nagy hatással lehet az eredményekre. A pipettázási hibák csökkentése érdekében győződjön meg arról, hogy magas színvonalú, megfelelő minőségű pipettákat használ. Szintén szánjon időt a pipettázásra. Ne rohanjon át a folyamaton, és győződjön meg arról, hogy a helyes technikát követi. Például tartsa a pipettát függőlegesen, és merítse a hegyet a megfelelő mélységbe.
Egy másik dolog, amit megtehetsz, az, hogy gyakorolja a pipettázási képességeit. A legtöbb pipette -gyártó edzési anyagokat vagy akár kezeket kínál - edzések során. Ezen erőforrások kihasználása valóban segíthet a technika javításában és a hibák csökkentésében.
Következetlen inkubációs idő
Az inkubálás egy másik lépés, ahol a variabilitás kúszhat. Ha a mintákat különböző időtartamra inkubálják, az az antitestek és antigének kötődésének különbségeihez vezethet. A következetes inkubációs idő biztosítása érdekében használjon időzítőt és állítson be egyértelmű emlékeztetőket. Győződjön meg arról, hogy a tányér összes kútja ugyanolyan ideig inkubálódik -e.
Az is jó ötlet egy kút -szigetelt inkubátor használatát. Az inkubálás során a hőmérsékleti ingadozások befolyásolhatják a reakció kinetikáját, így a hőmérséklet stabil tartása döntő jelentőségű. Ellenőrizze az inkubátor hőmérsékletét rendszeresen, hogy megbizonyosodjon arról, hogy az ajánlott tartományon belül van -e.
Hőmérsékleti ingadozások
A hőmérséklet óriási szerepet játszik az ELISA tesztekben. Ha a hőmérséklet túl magas vagy túl alacsony, akkor befolyásolhatja az antitestek és antigének kötődését, valamint az enzimek aktivitását. A hőmérsékleti ingadozások minimalizálása érdekében a vizsgálat megkezdése előtt tartsa a reagenseket és a mintákat az ajánlott hőmérsékleten. Ha hideg szobában dolgozik, hagyja, hogy a reagensek lassan felmelegedjenek szobahőmérsékletre, és használat előtt óvatosan keverjük össze őket.
Ezenkívül próbáljon hőmérsékleten ellenőrzött környezetben dolgozni. Kerülje a munkaállomás ablakok, légszellőző vagy más hőmérsékleti változások közelében történő elhelyezését. Ha lehetséges, használjon hőmérsékletet - vezérelt szekrényt vagy inkubátort egy beépített hőmérséklet -megfigyelő rendszerben.
A protokoll szabványosítása
Az egyik legjobb módszer az intra -vizsgálati variabilitás csökkentésére a protokoll szabványosítása. Ez azt jelenti, hogy ugyanazokat a lépéseket követi ugyanabban a sorrendben minden alkalommal, amikor ELISA tesztet futtat. Íme néhány dolog, amelyet figyelembe kell venni a protokoll szabványosításakor:
Reagens előkészítés
Győződjön meg arról, hogy a reagenseket helyesen készíti el. Kövesse gondosan a gyártó utasításait, és használja a megfelelő mennyiségeket és koncentrációkat. Jelölje meg egyértelműen a reagenseket, és tárolja azokat az ajánlott hőmérsékleten. A reagensek előkészítésekor használjon édesvizet és magas színvonalú vegyi anyagokat.
Lemezmosás
A lemezmosás fontos lépés a kötetlen anyagok eltávolításában a kutakból. Az inkonzisztens mosás az eredmények változékonyságához vezethet. Ha lehetséges, használjon lemezmátét, és győződjön meg arról, hogy a megfelelő paraméterekre állítja -e. Ha a lemezeket manuálisan mossa, használjon következetes technikát. Például töltse ki mindegyik kútot azonos szintre, és ugyanúgy törölje a folyadékot.
Mintakezelés
Gondosan kezelje a mintáit a szennyeződés és a lebomlás elkerülése érdekében. Használjon tiszta csöveket és pipette -tippeket, és tárolja a mintákat az ajánlott hőmérsékleten. Ha a mintákat hígítja, győződjön meg arról, hogy a helyes hígítási tényezőt használja, és alaposan keveri a mintákat.
Minőség -ellenőrzési minták használata
A minőség -ellenőrzési minták olyan minták, amelyek ismert értékekkel rendelkeznek, amelyeket a tesztminták mellett futtatnak. Segítenek a vizsgálat teljesítményének nyomon követésében, és észlelhetik az esetleges változékonyságot okozó problémákat. Győződjön meg arról, hogy magas minőségi minőség -ellenőrzési mintákat használ, és futtassa azokat több replikátumban.
Elemezze rendszeresen a minőség -ellenőrzési minták eredményeit. Ha észreveszi a várt értékektől való jelentős eltéréseket, ez azt jelezheti, hogy probléma merül fel a vizsgálatával. Vizsgálja meg a kérdést, és végezzen korrekciós intézkedéseket, például a pipetták újrakalibrálását vagy az inkubációs idő beállítását.
A munkaállomás szerepe
Mint beszállítóELISA kézi munkaállomás, Elmondhatom, hogy a jó munkaállomás elengedhetetlen az intra -vizsgálati variabilitás csökkentéséhez. Munkaállomásainkat úgy terveztük, hogy stabil és következetes környezetet biztosítsanak az ELISA tesztekhez. Nagyszerű minőségű anyagokból készülnek, amelyek ellenállnak a vegyi anyagoknak és a hőmérsékleti változásoknak.
A munkafelület lapos és szintű, ami elősegíti a pontos pipettát. Kínálunk opcionális kiegészítőket is, például hőmérsékleten szabályozott blokkokat és lemezrázókat, amelyek tovább javíthatják a vizsgálat teljesítményét. Ha még mindig egy régi vagy megbízhatatlan munkaállapotot használ, akkor ideje lehet fontolóra venni a frissítést.
Kapcsolódó munkaállomások
Ha más típusú vizsgálatokban, például PCR -ben vagy sejtelemzésben vesz részt, akkor is kínálunkPCR vagy QPCR kézi munkaállomásésCellalízis -kézikönyv munkaállomás- Ezeket a munkaállomásokat ugyanolyan figyelmet fordítják a részletekre és a minőségre, mint az ELISA munkaállomásainkra, és ezek segíthetnek a variabilitás csökkentésében is.
Csomagolás
A kézi munkaállomás ELISA -tesztjének vizsgálatának csökkentése az ELISA -tesztben időt és erőfeszítést igényel, de ez határozottan megéri. Az általam megosztott tippek követésével, például a pipettázási hibák csökkentésével, a protokoll szabványosításával, a minőség -ellenőrzési minták felhasználásával és a jó munkaállomással megbízhatóbb és következetesebb eredményeket kaphat.
Ha érdekli, hogy többet megtudjon a mirőlELISA kézi munkaállomásVagy bármely más termékünk, szívesen hallanánk rólad. Vegye fel velünk a kapcsolatot, hogy elindítson egy beszélgetést az Ön igényeiről és arról, hogyan segíthetünk a vizsgálati teljesítmény javításában.
Referenciák
- Bishop, ML, Fody, EP és Schoeff, Le (2018). Klinikai kémia: technikák, alapelvek, korrelációk. Wolters Kluwer.
- Wild, D. (szerk.). (2013). Az immunoassay kézikönyv. Elsevier.
- Pipetta gyártó edzőanyagjai.